正置式生物熒光成像系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)是怎樣的?
更新時間:2022-07-20 點擊次數(shù):476
正置式生物熒光成像系統(tǒng)是利用發(fā)光效率高的點光源,通過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光365nm或紫藍(lán)光420nm)作為激發(fā),激發(fā)標(biāo)本中的熒光物質(zhì)發(fā)出各種顏色的光,然后通過物鏡和物鏡的放大觀察。這樣,在強(qiáng)反差背景下,即使熒光很微弱,也很容易識別,靈敏度很高,主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能和化學(xué)成分的研究。
正置式生物熒光成像系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)由普通光學(xué)顯微鏡和一些附件(如熒光光源、激發(fā)濾光片、雙色分光鏡、阻擋濾光片等)組成。熒光光源一般采用超高壓汞燈(50-200w),可以發(fā)出各種波長的光,但每種熒光物質(zhì)都有一個激發(fā)光波長產(chǎn)生*的熒光,所以需要加激發(fā)濾光片(一般是紫外、紫、藍(lán)、綠激發(fā)濾光片),這樣只有特定波長的激發(fā)光可以傳輸?shù)皆嚇?,而其他光可以被吸收。每種物質(zhì)在受到激發(fā)光照射后,在極短的時間內(nèi)發(fā)出波長較長的可見熒光。熒光具有特異性,一般比激發(fā)光弱。為了觀察特定的熒光,需要在物鏡后面添加一個阻擋(或抑制)濾光片。它有兩個作用:一是吸收和阻擋激發(fā)光進(jìn)入目鏡,以免干擾熒光而損傷眼睛;另一種是選擇并讓特定的熒光通過,呈現(xiàn)特定的熒光顏色。這兩個過濾器必須同時選擇和使用。
正置式生物熒光成像系統(tǒng)適用于組織和細(xì)胞熒光圖像采集。與現(xiàn)有熒光顯微鏡緊密結(jié)合,有效提高Z軸分辨率和對比度,去除非焦平面熒光信號;apotome模式和普通模式自由切換;通過蔡司圖像處理軟件控制拍攝的圖像;可實現(xiàn)多通道熒光疊加、時間點映射、三維成像等功能;適用于各種生物熒光圖像的采集。