熱反射式激光共聚焦顯微鏡是近十多年研制成的高光敏度、高分辨率的新型儀器。它以激光為光源，由共聚焦成像掃描系統(tǒng)、電子光學(xué)系統(tǒng)和微機(jī)圖像分析系統(tǒng)組成。光束經(jīng)聚焦后落在樣品(組織厚片或細(xì)胞)不同深度的微小一點(diǎn)，并作移動(dòng)掃描，通過電信號彩色顯像，可使樣品內(nèi)任何一點(diǎn)的反射光形成的圖像，都被準(zhǔn)確地接收下來并產(chǎn)生信號，傳遞到彩色顯示器上，再連接微機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析處理

 

　　共聚焦系統(tǒng)的光源為離子激光器或HeNe激光器，光源發(fā)出的激光束通過照明針孔后成為點(diǎn)光源P。點(diǎn)光源P通過分東器進(jìn)入高數(shù)值孔徑顯微物鏡的成像系統(tǒng)成像后，在部分透明的被測樣品內(nèi)形成像點(diǎn)P。從像點(diǎn)P發(fā)出的散射光及反射光(波長為λ1)和其他熒光(波長λf>λ1),反方向經(jīng)過物鏡和分光鏡后，入射到單點(diǎn)探測器。單點(diǎn)探測器由探測器和放置在探測器前的針孔組成，它可以減少探測器的有效面積。探測器一般使用的是光電倍增管或雪崩光電二極管，探測器接收到的電信號最后由計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理。
 

　　①如果激光束聚焦點(diǎn)的直徑小于針孔的直徑,則P處的針孔可以去掉。
 

　?、谟行┎牧夏茏园l(fā)熒光,有些材料則需要用合適的染料上色。
 

　　共聚焦顯微鏡分類：
 

　　根據(jù)共聚焦點(diǎn)相對于標(biāo)本的移動(dòng)方式,目前共聚焦顯微鏡可分為3種。
 

　　其中z簡單的是在透鏡系統(tǒng)的光軸上固定住一個(gè)射限制點(diǎn)，控制其不發(fā)生術(shù)射，同時(shí)移動(dòng)標(biāo)本(標(biāo)本掃描);
 

　　另一類是多點(diǎn)掃描型，弧形燈發(fā)出的光東經(jīng)一個(gè)轉(zhuǎn)動(dòng)孔板精細(xì)定位，平行地進(jìn)行掃描和檢測，也就是轉(zhuǎn)盤共聚焦顯微鏡;
 

　　最為常見的類型是單點(diǎn)掃描，即通過移動(dòng)反射鏡或使用聲光偏轉(zhuǎn)儀使激光通過光柵進(jìn)行偏轉(zhuǎn)。