熒光共聚焦顯微鏡使用紫外光作為光源，樣品發(fā)光或被熒光染料或熒光抗體染色后，照射待測物，受紫外光激發(fā)產(chǎn)生熒光。探測器對其進行探測，在顯微鏡下觀察物體的形狀和位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收和運輸，化學物質(zhì)的分布和定位等。熒光顯微鏡也稱為寬視場熒光顯微鏡。成像面較厚，會觀察到焦平面上下的干涉信號，影響實驗結(jié)果。因此，熒光顯微鏡只能觀察靜態(tài)的亞細胞結(jié)構(gòu)。那么它與激光共聚焦顯微鏡的區(qū)別在哪里？

　　
 

　　1、原理不同

　　

　?。?）熒光顯微鏡：熒光共聚焦顯微鏡以紫外光為光源，照射待測物體，使其發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀和位置。

　　

　?。?）激光共聚焦顯微鏡：在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上，安裝激光掃描裝置，用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針。

　　

　　2、特點不同

　　

　?。?）熒光顯微鏡：用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收和運輸，化學物質(zhì)的分布和定位等。細胞中的一些物質(zhì)，如葉綠素，被紫外線照射后會發(fā)出熒光；有些物質(zhì)本身不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色，受到紫外線照射后也能發(fā)熒光。

　　

　?。?）激光共聚焦顯微鏡：通過計算機進行圖像處理，從而獲得細胞或組織內(nèi)部微結(jié)構(gòu)的熒光圖像，在亞細胞水平上觀察Ca2+、pH值、膜電位等生理信號和細胞形態(tài)的變化。

　　

　　3、用途不同

　　

　　（1）熒光顯微鏡：熒光共聚焦顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)組成。用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)出熒光，經(jīng)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大后觀察標本的熒光圖像。

　　

　?。?）激光共聚焦顯微鏡：激光掃描共聚焦顯微鏡已用于細胞形態(tài)定位、三維結(jié)構(gòu)重組、動態(tài)變化過程等研究，并提供定量熒光測量、定量圖像分析等實用研究手段。與其他相關(guān)生物技術(shù)相結(jié)合，已廣泛應用于形態(tài)學、生理學、免疫學、遺傳學等分子細胞生物學領(lǐng)域。