熒光共聚焦顯微鏡使用紫外光作為光源，樣品發(fā)光或被熒光染料或熒光抗體染色后，照射待測(cè)物，受紫外光激發(fā)產(chǎn)生熒光。探測(cè)器對(duì)其進(jìn)行探測(cè)，在顯微鏡下觀察物體的形狀和位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收和運(yùn)輸，化學(xué)物質(zhì)的分布和定位等。熒光顯微鏡也稱為寬視場(chǎng)熒光顯微鏡。成像面較厚，會(huì)觀察到焦平面上下的干涉信號(hào)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，熒光顯微鏡只能觀察靜態(tài)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。那么它與激光共聚焦顯微鏡的區(qū)別在哪里？

　　
 

　　1、原理不同

　　

　?。?）熒光顯微鏡：熒光共聚焦顯微鏡以紫外光為光源，照射待測(cè)物體，使其發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀和位置。

　　

　?。?）激光共聚焦顯微鏡：在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上，安裝激光掃描裝置，用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針。

　　

　　2、特點(diǎn)不同

　　

　?。?）熒光顯微鏡：用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收和運(yùn)輸，化學(xué)物質(zhì)的分布和定位等。細(xì)胞中的一些物質(zhì)，如葉綠素，被紫外線照射后會(huì)發(fā)出熒光；有些物質(zhì)本身不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色，受到紫外線照射后也能發(fā)熒光。

　　

　?。?）激光共聚焦顯微鏡：通過計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理，從而獲得細(xì)胞或組織內(nèi)部微結(jié)構(gòu)的熒光圖像，在亞細(xì)胞水平上觀察Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)和細(xì)胞形態(tài)的變化。

　　

　　3、用途不同

　　

　?。?）熒光顯微鏡：熒光共聚焦顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)組成。用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)出熒光，經(jīng)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大后觀察標(biāo)本的熒光圖像。

　　

　　（2）激光共聚焦顯微鏡：激光掃描共聚焦顯微鏡已用于細(xì)胞形態(tài)定位、三維結(jié)構(gòu)重組、動(dòng)態(tài)變化過程等研究，并提供定量熒光測(cè)量、定量圖像分析等實(shí)用研究手段。與其他相關(guān)生物技術(shù)相結(jié)合，已廣泛應(yīng)用于形態(tài)學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等分子細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域。